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　　國(guó)內(nèi)外研究概況

　　菊花是菊科菊花屬多年生宿根草本植物，原產(chǎn)于我國(guó)。它花色繁多，品種豐富，具有很強(qiáng)的觀賞價(jià)值，是目前世界上栽培最廣的切花及盆花之一。它的繁殖可以用播種法、扦插法、分株法、組織培養(yǎng)法。在種苗生產(chǎn)上運(yùn)用最廣泛的方法是扦插和組培。由于菊花的病毒病種類(lèi)比較多，而且危害也較為嚴(yán)重。使用扦插繁殖苗，容易引起病毒病的擴(kuò)張和蔓延，因此莖尖脫毒培養(yǎng)和組培快繁生產(chǎn)母本植株，再生產(chǎn)扦插苗的技術(shù)，對(duì)優(yōu)良品種的脫病毒和復(fù)壯有著重要意義。組培技術(shù)在新育成品種的快速繁殖上，應(yīng)用得更為廣泛。在種質(zhì)資源的保存和利用方面，用試管方法保存大量的育種材料和品種，為以后的育種工作提供各種材料，比在大田保種更容易和有利于節(jié)省土地和人力。國(guó)內(nèi)外對(duì)菊花的組織培養(yǎng)研究自1972年以來(lái)，有過(guò)不少報(bào)道，目前快速繁殖的技術(shù)已經(jīng)很成熟。但在脫毒、菊花花瓣育種和無(wú)糖培養(yǎng)方面的研究還在不斷深入。

　　有效的培養(yǎng)方法

　　1、培養(yǎng)基配方

　　誘導(dǎo)萌芽培養(yǎng)基：MS+BA 0.3mg/L+NAA 0.1mg/L

　　增殖培養(yǎng)基：MS+BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/l

　　生根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA 0.1mg/L

　　2、培養(yǎng)程序

　　取材菊花能夠產(chǎn)生再生植株的器官很多，以組培快繁為目標(biāo)最好選莖尖、莖段、花蕾為外植體培養(yǎng)增殖效果最好。選取用扦插苗培育的無(wú)病蟲(chóng)害、健壯的植株，在其上取材，可保持其優(yōu)良品種特性。在取材前2~3周，將入選株置于溫室內(nèi)培養(yǎng)，不要對(duì)葉面噴水，這樣能夠提高滅菌的成功率。接種前切取帶腋芽的莖段或未開(kāi)的花蕾，這時(shí)花瓣外有一層薄膜包著，里面是無(wú)菌的。滅菌處理時(shí)莖尖的嫩葉不要?jiǎng)兊锰�干凈，以免傷口面暴露太大，使莖尖受到過(guò)大的損害。滅菌莖段除去葉片，只留一小段葉柄。材料初步切割后，用洗衣粉水漂洗三次，用自來(lái)水沖凈后，將其放入含有三滴吐溫的0.1%升汞溶液中消毒12min，并不時(shí)搖動(dòng)，然后用鑷子將其夾入含三滴吐溫的8%次氯酸鈉溶液中浸泡8min（超凈工作臺(tái)上）并不時(shí)搖動(dòng)。于無(wú)菌水中漂洗二次后待用。切割將莖切去1小段，這樣可減少滅菌藥物的毒害。切除莖尖上的幼葉；若是蕾須剝?nèi)セū�，露出里面半球形的花序軸，再視其大小縱切4~6塊，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。生長(zhǎng)及分化外植體經(jīng)培養(yǎng)后，一般20~40D莖尖處可分生出新芽，莖斷的葉腋處也會(huì)萌發(fā)出叢生芽，基部生長(zhǎng)的愈傷組織也會(huì)分化出新芽。而花蕾外植體經(jīng)過(guò) 15~20D的培養(yǎng)，會(huì)形成愈傷組織；再經(jīng)過(guò)20~30D的培養(yǎng)，愈傷組織就會(huì)分化出較多的叢生芽。將從以上外植體誘導(dǎo)分化出的叢生芽，分切成數(shù)塊放入增殖培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)。開(kāi)始分化率和分化苗的數(shù)量都較小，隨繼代次數(shù)增加，分生苗很快就能夠增多起來(lái)。增殖的方式除誘導(dǎo)叢生芽增殖外，還可用莖切段作微型扦插來(lái)繁殖，它的增殖速度也完全能滿(mǎn)足快速繁殖的要求。方法是用各種再生途徑產(chǎn)生的嫩莖為材料，培養(yǎng)其長(zhǎng)到一定高度時(shí)，把它切成節(jié)段，一般是一葉為一段，然后將切斷的基部插入增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)。28D天后，腋芽即可長(zhǎng)成新的小植株，重復(fù)上述的方法不斷進(jìn)行繼代培養(yǎng)，從而達(dá)到快繁殖目的。生根培養(yǎng)在繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)25~30D進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶時(shí)，將那些生長(zhǎng)正常，苗高達(dá)到2~3CM的單株嫩莖切下，插到生根培養(yǎng)基中，7D后可形成有突起的淡綠色根原基，經(jīng)過(guò)2周培養(yǎng)后，即可生根。菊花的生根非常容易，在多種生長(zhǎng)素濃度下，乃至不加任何生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上，都可以獲得100%的生根效果。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及調(diào)控技術(shù)

　　菊花出瓶苗的標(biāo)準(zhǔn)時(shí)葉色濃綠，粗壯，苗高2~3CM，有根且根系發(fā)達(dá)。經(jīng)過(guò)渡培養(yǎng)的下地苗，則要求小苗葉色正常，濃綠，植株矮壯。

　　菊花是一種比較容易進(jìn)行組織培養(yǎng)的植物，適用于菊花的培養(yǎng)基種類(lèi)很多，它對(duì)激素的要求不很?chē)?yán)格，適應(yīng)范圍較廣，菊花在組織培養(yǎng)中是一種較不容易因?yàn)榧に貪舛鹊母叩投�引起變異或玻璃化的一個(gè)種類(lèi)。但是BA含量不應(yīng)超過(guò)10mg/L，NAA不應(yīng)超過(guò)2mg/L。菊花繼代苗的植株應(yīng)達(dá)到葉形、株形正常，增殖培養(yǎng)率可達(dá)到5~10倍以上。

　　菊花在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的溫度適應(yīng)范圍較寬，在22~28℃都可以。但溫度過(guò)低，會(huì)使苗質(zhì)脆弱，生長(zhǎng)速度延緩；溫度過(guò)高培養(yǎng)基水分蒸發(fā)較快，致使植株還未分化到所需程度，就開(kāi)始出現(xiàn)干萎。所以溫度最好在24~26℃之間。培養(yǎng)室光照每天12h，光照在1000~4000lx都可以生長(zhǎng)，但是光照過(guò)弱會(huì)使幼苗出現(xiàn)徒長(zhǎng)現(xiàn)象，莖軟葉細(xì)弱，低質(zhì)量的組培苗，出瓶后的過(guò)渡成活率也低。因此光照以2500~3000lx為宜。用來(lái)生根的單株嫩莖必須有1~2CM 高，在生根培養(yǎng)基上生長(zhǎng)15D后，苗高才能達(dá)到2~3 CM，有2~3條根長(zhǎng)達(dá)1~2CM的不定根。最好生根率達(dá)100%后，才可出瓶煉苗。如若還有少部分植株未長(zhǎng)出足夠的根系時(shí)，可將瓶苗在上述環(huán)境培養(yǎng)條件下延緩幾日，待其長(zhǎng)出根系時(shí)再出瓶。

　　出瓶苗的過(guò)渡管理

　　菊花的有根苗移栽成活容易，將有根的植株從瓶中用鑷子輕輕夾出，洗凈根部黏附的瓊脂，栽入珍珠巖基質(zhì)中。移栽前期將空氣濕度保持在75%~85%之間，遮光率為40%，環(huán)境溫度控制在20~26℃，就可使試管苗在20D左右移栽成活，并長(zhǎng)出新根新葉。經(jīng)1~2個(gè)月的管理，便可定植于富含腐殖質(zhì)，經(jīng)過(guò)滅菌處理的砂質(zhì)壤土中。菊花喜歡微潮偏干的土壤環(huán)境，在定植時(shí)不必施用基肥，隨著小苗對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)，可每隔1~2周追稀液體肥料一次。由于菊花有忌高溫、喜涼爽的習(xí)性，菊花試管苗定植后，不可接受過(guò)強(qiáng)的日光照射，應(yīng)該采用先遮蔭再逐漸增加光照的管理方法。由于菊花的過(guò)渡成活率比較高，所以有時(shí)也可以從瓶?jī)?nèi)出來(lái)就直接下地栽培，但管理呀非常細(xì)心。